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FlowCytomix操纵罕见题目
Flow cytomix实行之前留意事变
1、混和:
在预备珠子混和物的时分,吸出的珠子间接加到管子的底部,以免珠子留在管壁有丧失。
混和尺度品或样品的时分立刻涡旋珠子,在把试管放到流式细胞仪之前每个样品再次涡旋3-5秒,如许可以更好的在FL3/FL4通道区分珠子的品种。
2、制止双倍的珠子数量:
在把珠子的溶液加到测定板上的时分,把珠子加到孔中的尺度品或样品的溶液中,确保不要粘附到孔的边上。
3、梗塞过滤板:
血清或血浆样品在洗濯历程中大概梗塞过滤板,假如产生这种状况,警惕的推进经过板孔的针。
统一样品Flow cytomix与ELISA所得后果差别
荧光陈诉体系比ELISA具有更多的上风,好比静态范畴更大。由于庞大性和珠为底子的动力学剖析,用ELISA所得的定量后果大概与Flow cytomix 所得的差别。因而,只与所得值正相干,而不是比力ELISA和Flow cytomix的相对值。
什么是血清血浆的可以检测到的牢靠的最低值
血清或血浆中的细胞因子常常会低于惯例免疫检测的程度,这是由于大少数细胞因子仅仅在本身四周具有较高的免疫活性,并且少数状况下,具有半衰期。因而,可以公道的假定,仅仅在呈现病理变革的时分细胞因子才会在满身的血清和血浆中检测出较高的数目。关于趋化因子和生长因子大概发生较高的程度和较长的半衰期,因而更容易被检到。
尺度品留意事变
1、尺度品的预备:在开端之前离心尺度品管;
2、尺度品的创建:不要用浓缩12个小时后的尺度品,每个实行都要用奇怪的尺度品浓缩品;
3、严厉依照阐明书操纵,微珠的量不准确会影响实行的敏理性;
4、FlowCytomix是用PE荧光标志的,在参加指示试剂之后一切步调都要避光,以取得最大荧光信号。