纳米相干罕见题目汇总

技能题目

一、综合性题目

1、试剂外表基团的量大概浓度——需分表列明

>###外表带的多聚赖氨酸量或是比例是几多

质量比是PLL：Fe=0.2：1

2、浓度

（1）浓度

>###，PEG化氧化铁，>###的铁浓度是1mg/ml，

>###，>###和>###的铁浓度是4mg/ml

>###，柠檬酸钠修饰的Fe3O4，纳米银浆按总质量算

银纳米颗粒0.1mg/ml

金纳米颗粒的OD值一样平常是5，金单质的质量0.05mg/ml(金质量计)。

3、产品溶剂或产品身分

4、颗粒浓缩能否可以用去离子水？

可以

5、 产品怎样灭菌？可以低温大概其他手腕？

产品在出售前曾经用0.22微米的滤膜除过菌，无需再次除菌。另低温会毁坏产品性状，不行低温灭菌

6、产品保质期多久？在利用历程大概寄存久了产生产品收集的题目怎样办理？

ag九游的产品保质期是12个月。在保质期内，ag九游的产品一样平常是不会呈现团圆征象的，若您买回的产品还未利用，也未添加任何试剂，又在保质期内，ag九游答应是可以收费退换的。

7、磁性是几多？

70emu/g，ag九游产品的这个磁性强度照旧比力大的，也是ag九游产品的上风之一。

8、生物相容性好，用什么数听说明呢？

做细胞活性实行，参加量后，看细胞有没有殒命,要是没有殒命,阐明相容性很好.

9、产品稀释，假如离心一样平常几多转速符合？

波动的话1万30分钟都不克不及完全离上去，不波动的话5000转5分钟就可以了。

10、纳米颗粒的饱和磁化强度是用什么检测的？

振动样品磁强计。

11、3.5mg/mlMnZnFe2O4@OA中3.5mg/ml指什么？

3.5mg/ml便是Fe的含量。（OA是油酸）

12、你们磁性纳米颗粒的制造办法是什么？共沉淀？

现在ag九游的产品大局部是用共沉淀法制得的，用共沉淀法制得产品也是最波动的，请求的国度二级尺度物质也是用共沉淀法制得的，ag九游这有低温热解法做的，但不克不及批量成产，以是代价比力贵。

13、你们的磁性纳米颗粒怎样完成靶向的作用呢?

抗体靶向，大概用磁铁吸。

14、你们在什么仪器上测粒径散布的

DLS是粒度电位剖析仪（Malvern，ZETA SIZER ，Nano ZS90），电镜尺寸经过“力度散布盘算”软件剖析失掉的

二、>###

1、>###的摩尔浓度是几多呢？是用原子吸取测试的吗？

A：由于产品的4mg/ml因此Fe来计的，以是该产品的摩尔浓度是4/56=0.0714mol/L.产品浓度不是用原子吸取测试的，是用紫外可见光谱测试的，用邻二氮菲显色测试的。

2、>###怎样浓缩保管

超纯水浓缩，然后用0.1M的四甲基氢氧化铵溶液调pH到中性或稍偏碱性保管。

3、>###简介

颗粒核心是二巯基丁二酸，羧基来自于二巯基丁二酸，最外层便是羧基，电镜尺寸一样平常在10nm左右。一样平常注射活体都用这个，二巯基丁二酸便是指DMSA。水相的磁性纳米颗粒便是>###。

4、小鼠MRI造影时的保举用量（如>###），差别肿瘤用量能否也会差别

稍有差别，可依据详细状况做响应调解，一样平常的保举用量是100mg铁每千克小鼠体重

5、>###外表包被的是什么？

颗粒是DMSA外表修饰的

 6、有响应的卵白质交联试剂盒么？照旧ag九游本人要探索EDC+Solfo-NHS的用量？

可以用EDC/sulfo-NHS的办法偶联，这个办法比力成熟，但触及到在纳米颗粒偶联的时分实在最次要的是要坚持颗粒的波动性，颗粒的波动性与电荷有很大干系，以是用差别等电点的卵白质举行偶联在反响缓冲液pH上是差别的，以是ag九游没措施做出响应的试剂盒。到时分ag九游会提供一个大约的偶联步调，内里有试剂、卵白质、偶联剂的用量弛缓冲液的信息等，根本您可以照着做，针对您的卵白质您还可以稍做一些调解，尤其是缓冲液的选择。假如您真实不肯意做的话，也可以交给ag九游公司帮您做，公司也有定制化的商业，但必要别的免费。

三、>###

1、羧基化Fe2O3磁性纳米颗粒的水动力尺寸？

40-70nm。

四、>###

1、PEI_Fe3O4可否进入到细胞核

不克不及进入

2、产品是由于什么缘故原由进不了细胞核呢？是粒径大了进不去吗？假如举行外表修饰，有大概进核吗？怎样修饰进核呢？你们公司能帮助做修饰吗？

3、贵公司用于RNA转染的纳米颗粒，其外表修饰的无机物是PEI吗？无机物的含量是怎样的呢？

ag九游公司的磁转染纳米质料是Fe3O4纳米颗粒的核，外表用PEI修饰，PEI的量没有做过详细剖析，但外表电位较正，曾经可以证明PEI的乐成修饰，若有须要前面大概会思索做热重等。

4、贵公司用于RNA转染的纳米颗粒电镜尺寸怎样？在超纯水中的外表电势是怎样的？

电镜尺寸在10nm左右，终极产品疏散在纯水中，zeta电位高于30mV（丈量值一样平常在40～50mV之间）

5、为了直观验证RNA被转入细胞，我想用荧光染料标志RNA，再与纳米粒子联合，联合后能否会招致荧光的淬灭？

ag九游已经做过用荧光标志纳米颗粒的研讨，没有发明会招致荧光淬灭的征象，只需您留意避光操纵，应该不会发生影响

6、与RNA混淆后，粒子会否团圆？对转染的服从影响怎样？

A：与RNA混淆后能否团圆次要与电荷有关，当溶液中负电荷过高时会招致团圆，团圆的确会影响转染服从，且会招致细胞毒性增长。依据ag九游客户的利用反应，依照正常利用比例不会招致颗粒收集，这也是ag九游产品的上风之一。

五、PEG化氧化铁

1、在磁性纳米颗粒上接分子量约3000的肽段，选PEG化的氧化铁符合吗？

符合，PEG化四氧化三铁比其他同类产品更抗吞噬，靶向性更强

2、肽段修饰在磁性纳米颗粒上，复合物的水动力尺寸还在纳米级别吗？

在的

3、小肽必要几多量？（PEG化磁性纳米颗粒（羧基末了）5mg）

质量比一样平常是Fe：小肽=1:0.5到1:1

4、货期多长

定制一样平常是三个月

六、裸γ-Fe2O3

1、磁性纳米质料的制备办法？

裸γ-Fe2O3的制备次要有两种办法：共沉淀法和低温热解法。共沉淀法是现在用来批量消费磁性纳米颗粒的次要办法，本实行室也接纳此办法，其缺陷是颗粒疏散不匀称，巨细不均一。低温热解法是现在比力抢手的一种研讨办法，现在不克不及批量消费，但颗粒匀称散布TEM照片分外美丽。如有客户想要低温热解法的产品，可以提供，但代价另算，要高许多。

七、细胞标志

1、干细胞标志办法？

取纳米颗粒用无血清的培育液浓缩成20ug/mL左右，参加细胞，30min后补加血清，孵育12-24h.

2、细胞标志有哪些检测办法？

一样平常是MRI造影和构造切片做普鲁士蓝染色

3、毗连上抗体后是用紫外测试？照旧用核磁质谱剖析呢？怎样验证毗连的乐成与否？

都可以，做紫外测试时，由于铁的吸光度比力大，以是必要卵白含量多一点，毗连的多，看的也明白，质谱的也做，但做的未几。要验证毗连的乐成与否，做一个纯化步调，一样平常有离心大概过凝胶柱等，看分散出来的铁那局部有无卵白，若量多的话，用紫外间接做，由于是测试卵白含量，保举您利用BCA试剂。

4、你们有没毗连抗体的步调，能不克不及发给ag九游先看一下？

抗体毗连步调许多，一样平常有EDC，但详细的毗连办法照旧要本人查文献的。

5、你们的纳米颗粒被细胞吞噬的多？有没有细胞毒性？应该是吞噬的多好照旧少好啊？

详细的吞噬几多是无法测试的，但若用ag九游保举的办法，ag九游可以包管细胞的标志率达90%以上。细胞毒性是有的，但很低，要看细胞是不是比力敏感，一样平常40ug/mL是没有题目的。若细胞吞噬的越多，毒性天然就大，但吞噬的越多，实行展现的结果越好，以是要选一个符合的比例。

6、卵白质和磁珠的物质的量的比是几多，终究ag九游的抗体是个单域抗体，分子量小许多。

ag九游是按质量最近加的，Fe跟抗体质量比为1：1，ag九游的抗体分子量是150k，ag九游的系统内里抗体是过量的。

7、但ag九游的抗体只要15k,也照质量加的话会不会过量太多了？

假如抗体分子量小的话可以按质量Fe:抗体=10：1。

8、在标志之后照旧要稀释一下的，照旧大约超滤下好了？

最好不要，你们没有符合的稀释手腕，很容易招致收集的，只管即便在偶联历程中不要把体积打的太大。

9、Fe的最佳标志浓度是几多？拿到产品要不要做什么浓缩举措？

取微量铁疏散在培育液中，包管每ml培育液含20ug铁，详细的量要依据客户的实行状况而定。

10、卵白质和磁珠反响后怎样分散？过柱子照旧接纳透析？多出来的硼酸系统要撤除吗？（袁辉教师）

假如波动的话可以过柱子，不波动的话得当离心即可，硼酸系统是用来缓冲的，不用去除。

八、造影

1、ag九游造影用的MRI机型及设置参数？

德国siemens公司 avanto 1.5T

2、做磁性靶向，必要保举纳米质料？

油酸修饰的、PEG修饰和DMSA修饰的都可以用。但主推>###，由于无机相的不克不及用在植物体内会有毒性，>###（制备利便）属于水相试剂，毒性小，>###为水相溶剂，毒性小，靶向性好

3、注射到小鼠体内的剂量怎样才干够不招致小鼠的殒命？

A: 当注射剂量依照每千克体重0.5mg铁的量注射时，小鼠是不会殒命的。（0.5mg/kg体重是保举剂量，便是说这个剂量就会无效果，但不克不及包管这个剂量就可以不使得小鼠殒命，殒命的缘故原由许多，假如注射速率过快也会招致殒命的）

4、小鼠注射时是不是转换到PBS那种中性的情况比力保险呢，怕小鼠受不了

A：中性情况的举行偶联反响容易招致团圆，这个PH跟卵白质的等电点干系很大，您可以试下，ag九游便是如许做的，ag九游偶联的如avastin大概美罗华都必需在PH9下做。

特别性题目

1、ag九游是用来看动脉粥样硬化易损斑块的，依照实际，ag九游是不盼望被腹腔内的巨噬细胞吞噬，盼望都进入斑块外部？

若产品部波动，那被巨噬细胞吞噬的时机就会大一点，若产品波动的话，就比力容易进入斑块外部，之前东大有做过相似如许干细胞的实行，实行后果便是进入斑块外部的比力多。ag九游的产品是比力波动的，疏散性好，终极疏散在水中，这也是ag九游的产品上风之一。

2、小鼠肿瘤注射的注射方案

按铁浓度为1mg/ml算，注射量是肿瘤体积的一半（肿瘤体积盘算方法是(ab2)/2,a是指肿瘤的长径，b是指肿瘤的短径）。值得留意的是注射必要比力细的针如胰腺贯注针举行多靶点注射

3、CT造影用碘油纳米乳植物实行

购置后一样平常4度密封可临时保管，也可在常温下短期寄存。这款产品绝对比力波动，并且结果很好。小鼠注射量保举量是100到200微升（碘浓度：48mg/ml），经过尾静脉注射1到4小时内会察看到分明的造影图像。由于该造影剂主动靶向到肝，可设置差别工夫节点的比较，好比1h，4h，8h，12h，24h等